倒平板就是培養(yǎng)平板培養(yǎng)基倒置。平板要求:平板平整,無(wú)凸起;平板無(wú)“掛壁”;培養(yǎng)基布滿整個(gè)平皿;培養(yǎng)基的量適宜;培養(yǎng)皿蓋無(wú)水汽。溫度在45度左右,最適合倒平板。如果要連續(xù)倒多個(gè)培養(yǎng)皿,尤其是在冬天往往容易凝固,一旦凝固則需要再加熱到較高溫度才能融化。
一、防止倒皿時(shí)的冷凝
有經(jīng)驗(yàn)的都知道,手心不燙手背燙,這是一個(gè)經(jīng)驗(yàn)數(shù)據(jù),此時(shí)的溫度在45度左右,最適合倒平板。如果要連續(xù)倒多個(gè)皿,尤其是在冬天往往容易凝固,一旦凝固則需要再加熱到較高溫度才能融化(玻璃體的特性)。所以建議此時(shí)有個(gè)50度的恒溫水浴開(kāi)著,隨時(shí)把裝培養(yǎng)基的三角瓶放進(jìn)去效果會(huì)好不少。
二、培養(yǎng)皿中有冷凝水
一般來(lái)說(shuō),都會(huì)有幾滴,影響不大。如果過(guò)多則需要注意。大概的情況是:倒皿前將平皿最好保持在35-40度的溫度(觸手有溫?zé)岣校?;保持平皿靜置環(huán)境溫度高一些。
三、倒已冷卻的瓊脂培養(yǎng)基
對(duì)已冷卻的培養(yǎng)基再融化頗感頭痛心煩,因?yàn)榉旁陔姞t上烤不僅需要耐心,還得加上小心,一不留神就會(huì)沖濕瓶塞;重新放入滅菌鍋加熱吧,好是好,可又嫌費(fèi)事。解決方法是用微波爐加熱,又快又好,融得徹底,用著放心。當(dāng)然,裝培養(yǎng)基所用的三角瓶得能夠放入微波爐才行(250ml)。
沒(méi)有微波爐怎么辦?用電爐要小心了,在電爐上直接加熱融化營(yíng)養(yǎng)瓊脂時(shí)應(yīng)注意在融化到上面剩最后薄薄的一層時(shí)應(yīng)用小火,緩慢加熱,防止氣體沖破薄層時(shí)導(dǎo)致爆沸,營(yíng)養(yǎng)瓊脂沖出三角瓶。
四、倒平皿保持均一性
傾注平皿要左三圈,右三圈的晃動(dòng),注意不要把平皿蓋沾上,并且要輕輕晃動(dòng)。
五、具體對(duì)待
前面幾點(diǎn)講了倒平皿的最適溫度保持在35-40度,但不同品牌的瓊脂質(zhì)量不一樣,同樣按照國(guó)標(biāo)中的配方瓊脂含量1.5%,有些瓊脂凝固很快,有些凝固慢一些,還有環(huán)境溫度偏低,瓊脂凝固也會(huì)快一些,要根據(jù)實(shí)際情況,適當(dāng)調(diào)整瓊脂的含量,在室溫較低時(shí)我們所配的培養(yǎng)基瓊脂用量就偏少一些,還有在倒平板和混勻時(shí)動(dòng)作要快一些,室溫實(shí)在太低,也可以把培養(yǎng)皿放到烘箱中適當(dāng)加熱一下(40度左右)。
六、避免氣泡
在倒平板時(shí)會(huì)產(chǎn)生氣泡,主要遵守以上各點(diǎn),加熱不要過(guò)高,融化即可,加強(qiáng)操作練習(xí),還有就是倒的時(shí)候要慢點(diǎn),最好能夠貼著平皿的壁倒下去。
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